當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > PCR試劑盒 > 源性成分PCR試劑盒 > 48T 0.2PCR管芝麻源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法
簡要描述:芝麻源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法及公司相關(guān)產(chǎn)品琥珀酸舒馬曲普坦質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSumatriptan succinate Porcinesolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISA試劑盒豬可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/4
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產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品名稱:芝麻源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法
產(chǎn)品規(guī)格: 48T 0.2PCR管
產(chǎn)品貨號:BK-P97241
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
活性炭顆粒(AR,20-50目)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格:AR,20-50目 載玻片細(xì)胞CYP2B1蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20 Humanplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit 人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
運(yùn)動升壓素Kinetensin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR HumanβLactoglobulin,β-LgELISA試劑盒人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA試劑盒規(guī)
甲硫二苯馬尼/二苯馬尼甲硫酸鹽Diphemanil mesylate質(zhì)量規(guī)格:>98% 載玻片細(xì)胞αSMA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20 HumanMaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAkit 人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
甲硫二苯馬尼(標(biāo)準(zhǔn)品)Diphemanil mesylate質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Mouse5-Nucleotidase,5-ELISA試劑盒小鼠5核苷酸酶(5-)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Humanneuraminidase,NAELISA試劑盒人神經(jīng)氨酸酶(NA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
吡嗪-2-羧酸,吡嗪單羧酸2-Pyrazinecarboxylic acid質(zhì)量規(guī)格:含量98%,化學(xué) 小鼠脂蛋白關(guān)聯(lián)1脂酶A2(LpPLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: LpPLA2 ELISA Kit 組織總巰基含量熒光定量檢測試劑盒20
鹽酸塞利洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Celiprolol 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定 基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA檢測試劑盒Monkeymaixmetalloproteinase11,MMP11ELISAKit 96T/48T Humanfocaladhesionkinase,FAKELISAKit人黏著斑激酶(FAK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人肝細(xì)胞;QSG-7701 [QSG7701]脫氧腺苷單嶙酸,英文名或英文縮寫:dAMP,級別:超,98%,規(guī)格:100u
大鼠腎系膜細(xì)胞;RMC 骨肉瘤細(xì)胞,U-2 OS細(xì)胞 Walker-256細(xì)胞,大鼠肝癌細(xì)胞(癌細(xì)胞接種到肝臟成瘤)3-(3,4-二羌基本)-L-炳安醋;L-多巴; 多巴; L-β-3,4-二羌基本炳安醋; β-[3,4-二羌本基]L-初油安基醋 3-(3,4-Dixy7noxyphqnyl)-L-clcninq; Lqvodopc; 3-xy7noxy-L-tyrosinq; 2-cMino-3(3,4-dixy7noxyphqnyl)propcnoic ccid; β-(3,4-Dixy7noxyphqnyl)-L-clcninq; Bqndopc; Dqcdopc; 1929/9/7
HCT116, 人結(jié)直腸癌細(xì)胞 HumanNATIVENEXTGELKIT天然蛋白NEXT 膠電泳試劑盒蛋白組學(xué)級RTsigma
MSTN Others Mouse 小鼠 MSTN / GDF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-葡萄糖酸鈣,英文名或英文縮寫:Calcium D-gluconate,級別:BR,97%,規(guī)格:10U
平衡鹽溶液HBSS85116-37-6(-)-二異蒎基錄(-)-Diisopinocampheyl chloroborane
芝麻源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法人胚腎細(xì)胞(亞系克隆);FIP293 人腎管狀上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL碳酸胍shēng huà shì jì容量:500毫克
人膀胱癌細(xì)胞;5637(HTB-9)蘆薈大皇速 cloq-qmodin 481-7-1
HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 壬二醋 cZqLcIC cCID 13-99-9
MDA-MB-435S 人導(dǎo)管癌細(xì)胞山梨酸鉀shēng huà shì j
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