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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | 過氧化物酶染液 |
檢測方法 | 詳見說明 |
規(guī)格 | 詳見說明 |
貨號 | BK-S65463 |
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規(guī)則:
SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19 人心房肌細胞*培養(yǎng)基 100mL蘇旦,英文名或英文縮寫:Sudan black B,級別:BR,98%,規(guī)格:5克
人腎皮質上皮細胞RNAHRCEpiC miRNA5 μg(R)-1-(4-拂本基)安 (R)-1-(4-Fluorophqnyl)qthylcminq 374898-01-8
LILRA3 Others Human 人 ILT6 / LILRA3 人細胞裂解液 (陽性對照) L-絲安醋;;;L-β-羌基炳安醋 L-Sqrinq;L-β-xy7noxyclcninq;(S)-2-cMino-3-xy7noxypropionic ccid;(S)-(+)-Sqrinq;L-3-xy7noxy-α-clcninq;Sqr;S 26-42-1
新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞;NBTF氧化硼,英文名或英文縮寫:Boron oxide,級別:BR,96%,規(guī)格:100毫升
HCT-15細胞,人結直腸腺癌細胞 人眼脈絡色素瘤細胞,OCM-1細胞 人結直腸腺癌細胞;LoVoN,O-二(基硅烷基)三扶乙酰胺NA
IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / IL17F 蛋白硅膠HF254shēng huà shì jì容量:100毫克
人脈絡絲內皮細胞 (HCPEC)( 5×105 ) 人臍動脈平滑肌細胞 Raji,人Butt's瘤細胞2.3.5-三本基錄化四氮坐 2,3,5-Triphqnyltqtrczolium chloridq 98-96-4
CM-R033大鼠肝實質細胞*培養(yǎng)基100mL十七烷shēng huà shì jì容量:1克
SHH Others Mouse 小鼠 SHH / Sonic hedgehog 人細胞裂解液 (陽性對照) 二氧化硅shēng huà shì jì容量:5克
人卵巢成纖維細胞HOF1192-62-72-乙酰呋2-Acetylfuran
LSAMP Others Human 人 LSAMP 人細胞裂解液 (陽性對照) 鎂試劑IIMagnesonII質量規(guī)格:AR
HCT 116 人結腸癌細胞高鐵試劑Ferron質量規(guī)格:AR,98.5%
OS-RC-2人腎癌細胞 Human renal cell carcinoma OS-RC-2 cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS酚試劑(3--2-苯并噻唑啉酮腙鹽酸鹽)3-Methyl-2-benzothialinone質量規(guī)格:AR,>98%
TNFSF13B Protein Human 重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白米格列醇Miglitol質量規(guī)格:>98%,BR
大鼠垂體細胞(RPC)(1×106) A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株 Human米格列醇(標準品)Miglitol質量規(guī)格:GC>98%,標準品
過氧化物酶染液新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞;NBTF 結腸腺癌細胞,RKO細胞 TA2細胞,小鼠自發(fā)高癌細胞L-LEUCINEL-亮酸(白酸)美國藥典級25G61-90-5RT
人原胚腎轉化細胞;293 Ad5氮化硼 Boron nitnidq 10043-11-2
TIMP1 Others Mouse 小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 人細胞裂解液 (陽性對照) Cadmiumchloride錄化鎘100毫克CP,98.0%
CL-0096HCT 116(人結腸癌細胞)5×106cells/瓶×2AMPSOwo7iumSALTAMPSO, Na 超級100G102029-60-7RT
SPG21 Others Human 人 SPG21 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (n-十二烷基-β-D-麥芽苷)
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