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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | Rb Phospho-Ser780 Antibody |
檢測方法 | 兔多克隆抗體 |
規(guī)格 | 50μl |
貨號 | BK-S64588 |
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規(guī)則:
動物上皮細胞生長添加物-aEpiCGS-2-a鹽酸頭孢他美酯(標準品)質量規(guī)格:效價測定Cefetamet pivoxil
荷蘭白花奶牛牛肺細胞;DCL1 肺腺癌細胞,SPA-A1細胞 SCaBER(膀胱鱗癌細胞)L-生物喋呤質量規(guī)格:>98%,BRL-Biopterin
EB病毒轉化的人B細胞;KM0501渥曼青霉素質量規(guī)格:>98%,美國進口,PI3K/AKT通路的抑制劑Wortmannin
FZD5 Others Human 人 Frizzled-5 / FZD5 人細胞裂解液 (陽性對照) 溴化新斯的明質量規(guī)格:>98%Neostigmine bromide
Ca Ski, 人細胞鹽酸頭孢卡品酯質量規(guī)格:JP;722~764μg/mgCefcapene pivoxil HCl
Promocell C-23061 Skeletal Muscle CellDiffereiation Medium, 骨骼肌細胞分化培養(yǎng)基(即用型) 500ml甘氨酸-DL-亮氨酸Glycyl-DL-leucine質量規(guī)格:進分
前脂肪細胞分化生長添加物PAdDSL-高脯氨酸L-Pipecolic acid 質量規(guī)格:>98%,BR
SELP Others Mouse 小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照) L-正纈氨酸L-Norvaline質量規(guī)格:99%,BR
人前列腺癌細胞;LNCaPL-叔亮氨酸L-tert-Leucine質量規(guī)格:0.99
HuH7-HCV細胞,人感染HCV肝癌細胞 小鼠癌高轉移細胞,MA-891細胞 SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7L-茶氨酸L-Theanine質量規(guī)格:≥98%,BR
T24, 人膀胱癌細胞 胚癌細胞,Pcc4細胞 NCI-H1299(人肺癌細胞)十一醛容量:25克
綠色熒光蛋白標記小鼠子細胞;U14-GFP2,6-二錄醌-4-錄亞安 2,6-Dichloroinoneonq-4-chloroimidq 101-38-
FGFR3 Others Mouse 小鼠 FGFR3 / CD333 人細胞裂解液 (陽性對照) 四甘醇,英文名或英文縮寫:TEG,級別:AR,98.5%,規(guī)格:5克
人皮膚成纖維樣細胞;HSF2葡萄球菌選擇性瓊脂容量:1克
人腸平滑肌細胞(HISMC)( 5×105 )7752-82-12-基-5-溴嘧啶2-Amino-5-bromopyrimidine
Rb Phospho-Ser780 AntibodyP388D1(小鼠樣瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢唑啉鈉(標準品)Cefazolin 質量規(guī)格:HPLC>95%,標準品
小鼠胚胎成纖維細胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)哌拉西林鈉Piperacillin 質量規(guī)格:>900μg//mg,USP,BR
CHODL Others Mouse 小鼠 CHODL / CHOndrolectin 人細胞裂解液 (陽性對照) 哌拉西林鈉(標準品)Piperacillin 質量規(guī)格:含量測定
LNCaP 前列腺癌環(huán)吡司胺; 環(huán)吡酮胺Ciclopirox Olamine質量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于細胞培養(yǎng)
Hs 578T人癌細胞 Hs human breast cancer cell line 578T DMEM+10%FBS環(huán)吡司胺; 環(huán)吡酮胺(標準品)Ciclopirox Olamine質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
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