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簡(jiǎn)要描述:肝脂酶(HL)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:假單胞菌瓊脂培養(yǎng)基F 英文名稱(chēng):Pseudomonas Agar for Detection of Fluorescin 產(chǎn)品規(guī)格:250g 假單胞菌瓊脂培養(yǎng)基P 英文名稱(chēng):Pseudomonas Agar Medium for Detection of Pyocyanin 產(chǎn)品規(guī)格:250g 液體乳糖培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):Fluid Lactose Me
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商品介紹:
測(cè)定意義: 肝酯酶是脂肪分解酶,在肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞中合成,存在于肝臟竇周間隙內(nèi)皮細(xì)胞表面和竇周間隙腔面的肝細(xì)胞微絨毛表面,可促進(jìn)脂蛋白中的向類(lèi)固醇激素轉(zhuǎn)化,血漿中的HL活性增高時(shí),血漿中小顆??蓪?dǎo)致LDL水平升高,加速動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。 測(cè)定原理 肝酯酶水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生α-萘酚,可與固藍(lán)B鹽形成紫紅色偶氮化合物,在595nm有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內(nèi)與肝酯酶活性成正相關(guān)。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、冷凍離心機(jī)、研缽、水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計(jì)、微量石英比色皿。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
肝脂酶(HL)測(cè)試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6645 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類(lèi)及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)礊榉磻?yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
1%亞碲酸鉀溶液 5ml*10
1瓶 LII細(xì)胞株 LII 低溫運(yùn)輸和保存
PBS-Tween20洗液 PBS-Tween20 lotion 250g
100mg 膠原Ⅲ型 Collagenase Type Ⅲ 4℃保存
250mL Succinate Buffer(琥珀酸緩沖液),0.2M,pH4.5 Succinate Buffer,0.2M,pH4.5 常溫保存
50次 液體樣品蛋白純化回收試劑盒 Liquid Sample Protein Purification Kit 常溫保存
2 ug psiRNA-hH1-neo psiRNA-hH1-neo 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
50gsu 人重組TFIIB rhTFIIB 4℃保存
2 ug pDNR1 pDNR1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
改良CCD瓊脂添加劑 CCD Agar Additive 1ml*5
25g 豬膽鹽 Pig Bile Salts 室溫保存
肝脂酶(HL)測(cè)試盒微量法AU5 tag AU5 tag標(biāo)簽抗體 規(guī)格: 0.1ml
PAR4 蛋白活化受體4抗體 規(guī)格: 0.1ml
TBRG4 轉(zhuǎn)化生因子β調(diào)節(jié)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗羊IgM 規(guī)格: 0.1ml
FBXL15 FBXL15蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
EphB1/Eph receptor B1 酪蛋白激受體B1抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-FOXO4 (Ser197) 磷酸化叉蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml
SESN3 Sestrin3抗體 規(guī)格: 0.2ml
ZNF474/ZFP106 鋅指蛋白474抗體 規(guī)格: 0.1ml
TSPAN3 四分子交聯(lián)體3抗體(四旋蛋白) 規(guī)格: 0.2ml
C17orf57 17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框57抗體 規(guī)格: 0.2ml
CCDC92 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白92抗體 規(guī)格: 0.2ml
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