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簡要描述:β半乳糖苷酶(βGAL)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:葡萄糖酸鹽-雙岐桿菌鑒定 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 雙岐桿菌生化試驗無糖對照 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 醇發(fā)酵管-O157菌生化鑒定 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 纖維二糖-O157菌生化鑒定 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支
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特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:β半乳糖苷酶(βGAL)測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
檢測方法:可見分光光度法
產(chǎn)品貨號:BK-01S6750
產(chǎn)品分類:糖代謝系列
商品介紹:
測定意義: β-GAL(EC 3.2.1.23)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,能夠催化β半乳糖苷化合物中β半乳糖苷鍵水解,此外還具有轉半乳糖苷的作用。β-GAL不僅可為植物的快速生長釋放儲存的能量,還能在正常的多糖代謝、細胞壁組分代謝以及衰老時細胞壁降解過程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖殘基的水解,釋放自由的半乳糖。 測定原理: β-GAL分解對-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成對-硝基,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算β-GAL活性。 自備用品: 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本: 先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
250mL Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.6 Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.6 常溫保存
10mL 溶液,50mg/mL Spectinomycin Solution 4℃避光干燥保存
2 ug pQE-30LacIq pQE-30LacIq 低溫運輸,-20℃保存
3%NaCl阿拉伯糖 20支
250mL MES Buffer,1.0M,pH7.5 MES Buffer,1.0M,pH7.5 常溫保存
產(chǎn)毒培養(yǎng)基 Toxin-Producing Medium 250g
5g α- 酮戊二酸 α-Ketoglutaric Acid 4℃保存
50T 輪狀病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
5mL 口腔角質細胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
100mL AMPD Buffer,0.2M,pH8.0 AMPD Buffer,0.2M,pH8.0 常溫保存
1000mL 超快核酸銀染試劑盒 Rapid Silver Stain for Nucleic Acid 常溫
β半乳糖苷酶(βGAL)測試盒可見分光光度法Rabbit Anti-Bov IgG/Cy5 Cy5標記的兔抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml
BNP(H1G3) 人腦鈉素單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml
AMPD3 紅細胞苷脫氨3抗體 規(guī)格: 0.2ml
synaptotagmin-2 突觸結合蛋白相關基因2抗體 規(guī)格: 0.1ml
CDK8 周期素依賴性激8抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml
Donkey Anti-Goat IgG/FITC FITC標記的驢抗羊IgG 規(guī)格: 0.3ml
MARK2 絲/蘇蛋白激MARK2抗體 規(guī)格: 0.2ml
FAM70A FAM70A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Chicken IgG 羊抗雞IgG 規(guī)格: 1mg
NDUFS3 線粒體復合物NDUFS3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Band3/CD233 紅細胞陰離子交換蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)。
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