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簡(jiǎn)要描述:植物可溶性鈣濃度測(cè)試盒火焰光度法公司正在出售的產(chǎn)品:改良BPLS瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)BPLS Agar,Modified用于各種標(biāo)本中選擇性分離培養(yǎng)(ISO標(biāo)準(zhǔn))250MIO進(jìn)口、國產(chǎn)MIO Medium用于動(dòng)力、和鳥試驗(yàn)(FDA方法)250XLT4瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)XLT4 Agar用于食品中致病菌,特別是分離培養(yǎng)(Merck方法)250D/E中和肉湯進(jìn)口、國產(chǎn)D/E Neutralizing Broth
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實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱:植物可溶性鈣濃度測(cè)試盒火焰光度法
產(chǎn)品規(guī)格:咨詢
檢測(cè)方法:火焰光度法
產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6816
產(chǎn)品分類:離子系列
商品介紹:
測(cè)定意義: 鈣是植物結(jié)構(gòu)組成元素,主要構(gòu)成果膠酸鈣、鈣調(diào)素蛋白、肌醇六磷酸鈣鎂等,在液泡中有大量的有機(jī)酸鈣,如草酸鈣、檸檬酸鈣、蘋果酸鈣等。鈣能穩(wěn)定細(xì)胞膜、細(xì)胞壁,還參與第二信使傳遞,調(diào)節(jié)滲透作用,具有酶促作用等。測(cè)定原理 用蒸餾水提取植物樣品,采用火焰光度計(jì)測(cè)定樣品中的鈣含量。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、烘箱、100目篩、移液管、濃硫酸、離心機(jī)、蒸餾水、火焰光度計(jì)。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
15mL 蘇木素染色液 Hematoxylin Staining Solution 室溫保存
100mL MOPS Buffer,0.5M,pH6.0 MOPS Buffer,0.5M,pH6.0 常溫保存
100次 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 2(rDNA) Bacterial DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
2 ug pALEX c pALEX c 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
產(chǎn)組胺菌 Histamine producing bacteria Medium 250g
1瓶 SF-295細(xì)胞株 SF-295 低溫運(yùn)輸和保存
SS瓊脂 Salmonella Shigella Agar 250g
100mg Dexamethasone 4℃保存
50T 大腸桿菌(O139)PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
30次 中pH 緩沖液套裝 Medium pH Buffer Set 常溫保存(5×中pH上樣液需要-20℃保存)
2 ug pYFP-Gogi pYFP-Gogi 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
植物可溶性鈣濃度測(cè)試盒火焰光度法Shigella tropina 志賀氏菌菌體蛋白抗體 規(guī)格: 1mlElongin B/TCEB2 轉(zhuǎn)錄延伸因子B2抗體 規(guī)格: 0.1ml
YAP1 原基因Yes相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlFibrinogen gamma chain γ鏈抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-human IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的羊抗人IgG 規(guī)格: 0.1mlMRP8+MRP14 多藥耐藥相關(guān)蛋白8/9/14抗體 規(guī)格: 0.2ml
PCDHGA1 原鈣粘蛋白γA1抗體 規(guī)格: 0.2mlIFITM1/CD225 干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體 0.1ml
VGLL2 轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlCD43/SPN CD43抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Rad17 (Ser645) 磷酸化細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlZW10 peptide 著絲粒蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
KLK9 激肽釋放9抗體(舒管素9) 規(guī)格: 0.1mlPER1 protein 節(jié)律抑制蛋白PER1抗體 規(guī)格: 0.2ml
ZNF364/BCA2/RNF115 相關(guān)基因2抗體(鋅指蛋白364) 規(guī)格: 0.2mlp53 DINP1 p53誘導(dǎo)核蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
IFNA10/Interferon alpha10/Interferon alpha C 干擾素α10抗體 規(guī)格: 0.2mlCecropin 殺菌肽/天蠶抗菌肽抗體 規(guī)格: 0.2ml
IDI1 異戊烯焦磷酸1抗體 規(guī)格: 0.2mlTSPAN9/NET-5 四分子交聯(lián)體9/四旋蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
HEPACAM 肝細(xì)胞粘附分子抗體 規(guī)格: 0.2mlP73 protein P73瘤抑制基因抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Monkey IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗猴IgG 規(guī)格: 0.1mlMMP-2 基質(zhì)金屬蛋白-2抗體 規(guī)格: 0.1ml
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