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簡(jiǎn)要描述:土壤全硼測(cè)試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:泛酸測(cè)定進(jìn)口、國產(chǎn)Pantothenic Acid Assay Medium用于嬰兒食品和乳粉中泛酸測(cè)定250游離測(cè)定進(jìn)口、國產(chǎn)Free Biotin Assay Medium用于嬰兒食品和乳粉中游離測(cè)定250氣單胞菌基礎(chǔ)進(jìn)口、國產(chǎn)Aeromonas Medium Base(Ryan)用于氣單胞菌分離培養(yǎng)250醋酸鹽鑒別瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)ACETATE
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特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱:土壤全硼測(cè)試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
檢測(cè)方法:可見分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6902
產(chǎn)品分類:土壤系列
商品介紹:
測(cè)定意義: 硼是植物生長(zhǎng)發(fā)育必需的七種微量營養(yǎng)元素之一,土壤中硼素的含量高低直接影響著植物的生長(zhǎng)狀況。 測(cè)定原理 硼與甲亞胺在弱酸條件下形成棕黃色配合物,在420nm有特征吸收峰。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
2 ug pPICZα E pPICZα E 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
果糖(腦膜炎奈瑟氏菌專用) 20ml/支
2 ug pBV 220 pBV 220 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA) KIA 250g
1g 異丙基 -β-D- 硫代半乳糖苷 IPTG 4℃避光保存
固氮菌用阿須貝氏 Nitrogen-fixing bacteria with the A Sugai’s medium 250g
500 mL F12K(含1%雙抗) Cell Culture Medium -20℃保存
250mL Acetate Buffer(乙酸緩沖液),1M,pH3.5 Acetate Buffer,1M,pH3.5 常溫保存
10次 一站式RNA電泳套裝 One-Stop RNA Electrophoresis Kit 4℃保存
2 ug pGAPZ A pGAPZ A 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
氯化鈉瓊脂(2015藥典) Mannitol Salt Agar 250g
土壤全硼測(cè)試盒可見分光光度法NK-2R 神經(jīng)激肽A受體/K物質(zhì)受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
F-Actin 纖維狀肌動(dòng)蛋白抗體 0.1ml
4EBP2 eIF4E結(jié)合蛋白2抗體 0.1mlDog IgM/PE PE標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 規(guī)格: 0.1ml
NFX1 核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlPGGT1A/FNTA 蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移1α抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-MKK4(Ser80) 磷酸化絲裂原活化蛋白激激4抗體 規(guī)格: 0.1mlMTFR1 線粒體裂變調(diào)節(jié)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-IGF1R(Tyr1165+Tyr1166) 磷酸化胰島素樣生因子1受體抗體 規(guī)格: 0.1mlARMCX1 ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體 規(guī)格: 0.2ml
EphB1+EphB2+EphB3+EphB4 酪蛋白激受體B1+B2+B3+B4抗體 規(guī)格: 0.2mlRIPK3 受體結(jié)合絲蘇激3抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-c-Raf(Ser338/Tyr340) 磷酸化原基因c-Raf抗體 規(guī)格: 0.1mlMASP 甘露聚糖結(jié)合凝集素絲肽1抗體 規(guī)格: 0.2ml
DPP9/DPRP2 二肽基肽9抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgM/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml
PTPH1/PTPN3 蛋白酪磷酸H1抗體 規(guī)格: 0.2mlUCP-1 線粒體脫偶連蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rad51 Rad51抗體 規(guī)格: 0.1mlGoat Anti-human IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的羊抗人IgG 規(guī)格: 0.3ml
MAGE-A4 黑色素瘤相關(guān)抗原4抗體 規(guī)格: 0.1mlDog IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 規(guī)格: 0.1ml
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
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