簡要描述:睡眠嗜組織菌PCR檢測試劑盒廠家上海帛科生物相關產品:釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeA2(人腺樣囊性細胞)C127(小鼠腺細胞)5×106cells/瓶×2小鼠腸微血管細胞*培養(yǎng)基100mL
詳細介紹
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現,DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
睡眠嗜組織菌PCR檢測試劑盒廠家 | Histophilus somniPCR | BK-P9265 |
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環(huán)擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
CAL-27(人舌鱗細胞)5×106cells/瓶×2
SF767(人腦瘤細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠結腸細胞英文名稱:CT-26 WT
棉阿舒囊霉 Ashbya gossypii異常漢遜酵母 Hansenula anomala
鼠桿菌 Lactobacillus murinus植物蛋白提取試劑(帶酶抑制劑)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeA2(人腺樣囊性細胞)
C127(小鼠腺細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腸微血管細胞*培養(yǎng)基100mL
中慢生華癸瘤菌 Mesorhizobium huakuii鼠桿菌 Lactobacillus murinus
大鼠小腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica串珠鐮孢 Fusarium moniliforme
睡眠嗜組織菌PCR檢測試劑盒廠家N-(叔丁氧羰)-1H-吡唑-1-甲脒 210.24 N- (TERT butoxycarbonyl) -1H- pyrazole -1- formamidine*:152120-61-1分子量: C9H14N4O2
2-氯-4--6-三氟甲吡 196.559 2- -4- -6- three*:34486-22-1分子量: C6H4ClF3N2
2,4-二氯吡 147.99 2,4- two*:26452-80-2分子量: C5H3Cl2N
荷葉堿 Lotus leaf base 295.376分子量:C19H21NO2*:475-83-2
漢黃芩甙 Han Chinese 分子量:*:
地索奈德 Cable. 416.51分子量: C24H32O6*:638-94-8
3--5-甲氧吡 124.14052 3- amino -5- a*:64436-92-6分子量: C6H8N2O
李斯曼染色素 Liessmann dye 分子量:*:12627-53-1
N-(三正膦亞)-1H-并三唑-1- 408.43 N- (three phenyl phosphine subunit is -1H- and three -1-) benzene with methylamine*:124316-00-3分子量: C25H21N4P
2-嘧 105.1 Cyanopyrimidine 2-*:14080-23-0分子量: C5H3N3
4-(3-氯丙)啉 163.65 4- (3-) Ma Lan*:7357-67-7分子量: C7H14ClNO
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