乙型肝炎病毒(HBV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)準(zhǔn)備試劑與收集血樣:
雙重核酸試劑盒(熒光PCR法) 1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
性能:
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:檢測濃度小于0.1 U/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個月
人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WPS1
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21
中國倉鼠卵巢細(xì)胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21
中國倉鼠肺細(xì)胞;CHL
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO
二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-
中國倉鼠肺細(xì)胞;R 1610 [R1610]
中國倉鼠肺細(xì)胞;V79
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1
倉鼠卵巢細(xì)胞;Lec1
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1
二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-C
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-E2
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-p7
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。籆HO-HCV-NS2
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。?;CHO-HCV-NS4A
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4B
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。籆HO-HCV-NS5A
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。?;CHO 1beta9,12.5 Clone 36
敘利亞倉鼠細(xì)胞系;Syrian Hamster AV12
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。?;CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6
中國倉鼠卵巢細(xì)胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。?;CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。籆HO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)
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