C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;RMA培養(yǎng)細(xì)抱凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)抱胞六存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具依細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
1.配制」存培養(yǎng)基,于2C至8°C下儲(chǔ)存,夏至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于用細(xì)系。
2凍存貼壁細(xì)抱胞,利用傳代時(shí)所月方法輕柔地使細(xì)胞從廷織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)抱所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)染法或普使用 Countess(⑤自動(dòng)細(xì)計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)態(tài)數(shù)和活細(xì)百分比。根據(jù)所需活細(xì)
4.以大約100-200X9的離心力將細(xì)胞暴液楽心5至10分鐘。在無(wú)條件下小心鑰持掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)抱胞沉定。
注:心速度和時(shí)?取決于細(xì)種類(lèi)
5.月預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新暴浮細(xì)胞沉,將其調(diào)至該細(xì)抱適會(huì)的活細(xì)胞密度。凍細(xì)胞,使涅度每分鐘大約降低1C?;蛘?將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存?zhèn)}中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元
rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓
RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元
RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元
RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞
RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞
RLF, 大鼠淋巴成纖維細(xì)胞
rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞
rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞
RDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞
RLFs, 大鼠肺成纖維細(xì)胞
rCF, 大鼠心臟成纖維細(xì)胞
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元
mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞
MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞
CSC, 小鼠心肌細(xì)胞
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)
MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞
mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元
細(xì)胞名稱(chēng)
人絨毛膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞
人羊膜上皮細(xì)胞
人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞
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